Blotovanie
Blotovanie (Blotting) je súbor techník pre prenos proteínov, DNA alebo RNA z elektroforetického gélu na pevnú membránu (napr. nitrocelulózovú, PVDF). Náš sortiment pokrýva vybavenie pre rýchle a efektívne blotovacie systémy (Wet, Semi-Dry), ktoré zaisťujú kompletný prenos molekúl, zvyčajne do 15-30 minút. Potrebujete spoľahlivý systém pre Western Blot (proteíny), Southern (DNA) alebo Northern (RNA) blot? Nájdite tu kompletné vybavenie vrátane vertikálnych vaní a zdrojov pre váš experiment.
Radenie produktov
9 položiek celkom
Výpis produktov
Ovládacie prvky výpisu
9 položiek celkom
Blotovanie (Blotting) je súbor základných techník molekulárnej biológie, ktoré sa používajú na prenos (imobilizáciu) separovaných makromolekúl (DNA, RNA alebo proteínov) z gélu na pevnú nosnú membránu (najčastejšie nitrocelulózovú alebo PVDF). Tento prenos je nevyhnutný, pretože gély sú krehké a ďalšia manipulácia (napr. hybridizácia so sondou alebo inkubácia s protilátkami) je v nich veľmi zložitá. Membrána je robustná a umožňuje jednoduchý prístup k cieľovým molekulám.
Typy blotovacích techník
Názov techniky sa odvíja od typu molekuly, ktorá sa prenáša:
1. Western Blot (Prenos proteínov)
Najpoužívanejšia blotovacia technika. Proteíny sú najprv separované podľa veľkosti pomocou vertikálnej elektroforézy (SDS-PAGE). Následne sú proteíny elektroforeticky prenesené z gélu na membránu. Po prenose sa membrána inkubuje so špecifickými protilátkami (primárnymi a sekundárnymi) na detekciu konkrétneho proteínu.
2. Southern Blot (Prenos DNA)
Technika na detekciu špecifických sekvencií DNA. Fragmenty DNA sú separované na horizontálnej agarózovej elektroforéze a následne prenesené na membránu (zvyčajne kapilárnym prenosom). Membrána sa potom hybridizuje s DNA sondou.
3. Northern Blot (Prenos RNA)
Podobná technika ako Southern Blot, ale používa sa na analýzu molekúl RNA (napr. na štúdium génovej expresie). Vyžaduje extrémne čisté podmienky bez RNáz.
Naše vybavenie pre blotovanie
Pre úspešný prenos (najmä pri Western Blote) ponúkame kompletné systémy, ktoré sú súčasťou kategórie Elektroforézy, zdroje a dokumentácia gélov.
1. Blotovacie systémy (Blottery)
Sú to zariadenia, ktoré pomocou elektrického poľa zabezpečia prenos molekúl z gélu na membránu.
- Wet (Tank) Blotting (Mokrý prenos): Tradičná metóda, kde je "sendvič" (gél-membrána) ponorený vo veľkom objeme pufra a vystavený elektrickému poľu. Je to vysoko efektívna, ale časovo náročná metóda (niekoľko hodín až cez noc).
- Semi-Dry Blotting (Polosuchý prenos): Oveľa rýchlejšia metóda (typicky 15-60 minút). Používa len minimálny objem pufra nasiaknutý vo filtračných papieroch. Je ideálna pre rýchle Western Bloty.
2. Príslušenstvo
Pre prenos je nevyhnutný výkonný elektroforetický zdroj, ktorý je schopný dodať vysoký prúd (až 2-3 A) potrebný pre rýchly prenos proteínov.
